Bestemmelse af proteinkoncentration

Proteinkoncentrationsbestemmelse er bestemmelsen af ​​proteinkoncentration ved kemiske eller fysiske metoder og er en vigtig metode, der ofte bruges til at beregne genvindingsgraden for rensningsmetoder. Biuret-metoden biuret-metoden er den første metode til at bestemme proteinkoncentrationen ved kolorimetri. Svovlammonium forstyrrer ikke farveudviklingen, Cu2 + og proteinpeptidbindinger, og tyrosinrester er komplekse til dannelse af lilla blå Forbindelsen har en maksimal absorption ved en bølgelængde på 540 nm. Biuret-metoden bruges almindeligvis til bestemmelse af proteinopløsninger i området fra 0,5 g / l til 10 g / l. Grundlæggende information Specialistklassificering: kardiovaskulær undersøgelse: blodundersøgelse Gældende køn: om mænd og kvinder anvender faste: faste Analyseresultater: Under det normale: Almindelig i sygdomme såsom underernæring. Normal værdi: Normal værdi: 60-80 g / l Over normal: Almindelig i sygdomme såsom fedme. Negativ: positiv: Tips: Spis ikke for fedtet mad med højt proteinindhold dagen før, og undgå kraftig drikke. Normal værdi Den normale værdi af den menneskelige krop er generelt 60-80 g / l. Klinisk betydning Unormalt resultat 1. Biuret-metode: Biuret-metoden er den første metode til at bestemme proteinkoncentrationen ved kolorimetri. Svovlammonium forstyrrer ikke farveudviklingen, Cu2 + og proteinpeptidbindinger, og tyrosinrester kompleks, der danner lilla Blåt kompleks, der har maksimal absorption ved en bølgelængde på 540 nm. Biuret-metoden bruges almindeligvis til bestemmelse af proteinopløsninger i området fra 0,5 g / l til 10 g / l. 2. Lowry-metode: Cu + danner et kompleks med protein i en alkalisk opløsning, og derefter reducerer komplekset phosphor-molybdæn-phosphor-phosphorsyre-reagens (Folin-phenol-reagens), og resultatet er en mørkeblå farve. Denne metode er meget mere følsom end biuret-metoden og er egnet til bestemmelse af proteinopløsninger i området 20 mg / l til 400 mg / l. 3. Ultraviolet absorptionsmetode: De fleste proteiner har den karakteristiske maksimale absorption ved bølgelængde på 280 nm Dette skyldes tilstedeværelsen af ​​tyrosin, tryptophan og phenylalanin i proteinet, som kan bruges til at bestemme indholdet af 0,1-0,5 mg / ml. Proteinopløsning. Mennesker der skal tjekkes Der er mennesker, der er svage og svage, søvnige, hud, slimhinder og uopmærksomhed. Lave resultater kan være sygdomme: underernæring, muskeldystrofi resultater kan være høj sygdom: fedme, enkle fedme forholdsregler Tabu før testen: Spis ikke for fedtet mad med højt proteinindhold dagen før testen for at undgå kraftig drikke. Alkoholindholdet i blodet påvirker testresultaterne direkte. Efter kl. 20 dagen før den medicinske undersøgelse skal du faste. Krav til undersøgelse: Når du tager blod, skal du slappe af i sindet for at undgå sammentrækning af blodkar forårsaget af frygt og øge vanskeligheden ved blodopsamling. Ved målingen adsorberes en lille mængde proteinfarvestofkompleks på kuvettens væg, og mængden af ​​adsorption af komplekset er ubetydelig. Efter målingen kan den blå kuvette vaskes med ethanol. Inspektionsproces Personer blev venøst ​​opsamlet og analyseret i tid til serumseparation. Tegn en standardkurve: Tag en 96-brønds mikrotiterplade, og tilsæt reagenser. Efter tilsætning af reagenset, absorberes nøjagtigt 20 μl af prøveopløsningen i enzymstandardbrønden, tilsættes 200 μl BCA-reagens, rystes forsigtigt, inkuberes ved 37 ° C i 30-60 minutter, afkøles til stuetemperatur, brug tomt som kontrol og sammenlign ved 590 nm på mikropladerlæseren. Farve, med indholdet af bovint serumalbumin, som abscissen og absorbansen som ordinat, tegner en standardkurve. Under anvendelse af standardkurveemnet som en kontrol blev proteinindholdet i prøven fundet fra standardkurven baseret på absorbans af prøven. Ikke egnet til mængden Mennesker med en betydelig tendens til at blø. Bivirkninger og risici 1, subkutan blødning: på grund af pressetid mindre end 5 minutter, eller blodtrækningsteknologi ikke er nok osv., Kan forårsage subkutan blødning. 2, ubehag: Stikkestedet kan forekomme smerter, hævelse, ømhed, subkutan ekkymose synlig for det blotte øje. 3, svimmel eller besvimelse: i blodtrækningen på grund af følelsesmæssig overstress, frygt, refleks forårsaget af spænding i vagusnerven, blodtrykket faldt osv. Forårsaget af utilstrækkelig blodforsyning til hjernen forårsaget af besvimelse eller svimmelhed. 4. Risiko for infektion: Hvis du bruger en uren nål, kan du risikere infektion.