fibrinopeptid A

Fibrinopepide-A (FPA) er en peptidkædespaltning mellem sæd-16 og glycin-17 fra fibrinogen a (A) -kæden under virkning af thrombin og er sammensat af 1 til 16 aminosyrer. Fibrinpeptid A. Det er en pålidelig indikator for koagulationsaktiviteten i kroppen og den endelige dannelse af trombe i fibrin. Forhøjede plasma-FPA-niveauer afspejler koagulationssystemaktivering og thrombingenerering. Derfor findes det i hyperkoagulerbar tilstand og trombotisk sygdom, identifikation af primær og sekundær fibrinolyse og monitoreringsindikatorer under antikoagulanteterapi. Grundlæggende information Specialistklassificering: klassifikation af vækst- og udviklingsundersøgelse: blodundersøgelse Gældende køn: om mænd og kvinder anvender faste: faste Tip: Blodopsamling bør ikke være> 45 år, og de første 2 ml skal kasseres. Sprøjten skal være silicid eller plastsprøjte. Normal værdi 1,2 ± 0,8 μg / L. Klinisk betydning Forhøjede plasma-FPA-niveauer afspejler koagulationssystemaktivering og thrombingenerering. Derfor findes det i hyperkoagulerbar tilstand og trombotisk sygdom, identifikation af primær og sekundær fibrinolyse og monitoreringsindikatorer under antikoagulanteterapi. Høje resultater kan være sygdomme: spredt intravaskulær koagulation hos børn, graviditet med trombotisk sygdom, spredt intravaskulær koagulering hos ældre (1) Blodopsamling skal være glat og bør ikke være> 45 sek, og de første 2 ml skal kasseres. Sprøjten skal være silicid eller plastsprøjte. (2) Umiddelbart efter blodopsamling, sprøjt ind i reagensglasset, der indeholder antikoagulant og bland det hurtigt i isvand. Hvis det skal konserveres, er det mere egnet ved -20 ° C efter adsorptionsbehandling med bentonit. Inspektionsproces (1) Opsamling af plasmaprøver: 4,5 ml venøst ​​blod blev taget glat med en plastsprøjte (de første 2 ml blev kasseret), og et reagensglas indeholdende 0,5 ml af et antikoagulantia (heparinnatrium 500u og aprotinin 5000u) blev tilsat og blandet straks. Centrifuger ved 3000 omdr./min. I 20 minutter, separer plasmaet, og træk det øvre plasma til et andet rør til øjeblikkelig behandling eller opbevaring ved -20 ° C. (2) Bentonitadsorptionsbehandling af plasmaprøver: Formålet er at fjerne fibrinogen fuldstændigt. 40 mg bentonit blev tilsat til et 45 ml polypropylenplastisk centrifugerør, 0,5 ml adsorptionsbuffer blev tilsat, og blandingen blev grundigt blandet. 1 ml plasma blev tilsat, rystet og blandet på en cyclonblander og omrystet langsomt i 10 minutter. Centrifuge ved 5000 r / min i 15 minutter, aspirer supernatanten til et andet rør, og behandl det derefter en gang med bentoniten som beskrevet ovenfor. Derefter blev 1 ml af supernatanten aspireret og sat til et reagensglas indeholdende 50 ul af en 20 g / LTween 20-opløsning og blandet. Den endelige prøve er blevet fortyndet 20 gange. (3) FPA-belægning: 1 ug / ml FPA blev opløst i coating-puffer, polystyren-reaktionsplade blev tilsat, 200 ul / brønd, lukket og natten over ved 37 ° C. Hullet blev kasseret den næste dag. Pladen blev vasket 5 gange med vaskeopløsning, 3 minutter hver gang, tørret og skånet. (4) FPA-standard: 6 slags forskellige koncentrationer, såsom 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 ng / ml. 0,9 ml blev aspireret separat i en række små prøverør, og 0,1 ml arbejdskoncentration af anti-human FPA fra kanin blev tilsat til hvert rør. Plasmaprøverne, der skulle testes ved bentonitadsorptionsbehandlingen, blev opereret som ovenfor, og koncentrationerne på 1: 2, 1: 4 gange var som ovenfor. Hver af de ovennævnte rør blev omsat ved 37 ° C i 3 timer. (5) 200 ul af hvert af de ovennævnte rør efter inkuberingen blev pipetteret i hver brønd i det overtrukne FPA, og pladen blev inkuberet ved 37 ° C i 2 timer, vasket i 5 gange og tørret. (6) Hver brønd blev tilsat med HRP-ged anti-kanin IgG (fortyndet til arbejdskoncentrationen ved standardfortynding) 200 ul / brønd, og pladen blev inkuberet ved 37 ° C i 2 timer, vasket i 5 gange og tørret. (7) Tilsæt 200 μl af den frisk fremstillede substratopløsning til hver brønd, og reager nøjagtigt ved 37 ° C i 3 minutter i mørke, og tilsæt straks 3 mol / L H2SO 450 μl til hver brønd for at afslutte reaktionen. A-værdien (492 nm) for hver brønd blev bestemt på enzymmærket. Ikke egnet til mængden Hæmofili og diffus intravaskulær koagulation. Bivirkninger og risici Risiko for infektion: Hvis du bruger en uren nål, kan du risikere infektion.