Malaria indirekte immunfluorescenstest

Der er mange serologiske diagnostiske metoder til malaria.Dette afsnit introducerer kun den almindeligt anvendte indirekte immunofluorescens test. Mennesker, der skal undersøges: mennesker med åbenlyse kulderystelser, kropsbevævning, bleg hudfarve, cyanotiske læber, tør hud, irritabilitet, hovedpine, ubehag, anoreksi og andre symptomer. Grundlæggende information Specialistklassificering: Undersøgelse og klassificering af infektionssygdomme: blodundersøgelse Gældende køn: om mænd og kvinder anvender faste: faste Analyseresultater: Under det normale: Normal værdi: ingen Over normal: Negativ: Negativt <1:20, hvilket indikerer ingen infektion med malaria. positiv: Den positive detektionshastighed for metoden med fluorescerende antistof er generelt højere end den protozoale detektionshastighed. Antistoftiter for patienter med falciparum malaria er 1:80 eller højere og kan betragtes som en markør for bærere eller nylig malariainfektion. Tips: Spis ikke for fedtet mad med højt proteinindhold dagen før blodet trækkes, undgå kraftig drikke. Alkoholindholdet i blodet vil have direkte indflydelse på testresultaterne. Efter kl. 20.00 dagen før den medicinske undersøgelse skal fasten startes i 12 timer for at undgå, at testresultaterne påvirkes. Normal værdi Negativt <1:20. Klinisk betydning Den positive detektionshastighed for metoden med fluorescerende antistof er generelt højere end den protozoale detektionshastighed. Antistoftiter for patienter med falciparum malaria er 1:80 eller højere og kan betragtes som en markør for bærere eller nylig malariainfektion. Positive resultater kan være sygdomme: malaria, cerebral malaria, lungmalaria, malaria Før inspektion: 1, spiser ikke for fedtet mad med højt proteinindhold dagen før blodet for at undgå kraftig drikke. Alkoholindholdet i blodet påvirker testresultaterne direkte. 2. Efter kl. 20 dagen dagen før den medicinske undersøgelse, skal du begynde at faste i 12 timer for at undgå at påvirke testresultaterne. 3, bør slappe af, når du tager blod, for at undgå sammentrækning af blodkar forårsaget af frygt, øge vanskeligheden ved blodopsamling. Efter inspektion: 1. Når blod er trukket, kræves lokal komprimering i pinhullet i 3-5 minutter for at stoppe blødningen. Bemærk: Gnid ikke, for ikke at forårsage subkutant hæmatom. 2, pressetiden skal være tilstrækkelig. Der er forskel i koagulationstid for hver person, og nogle mennesker har brug for lidt længere tid til koagulation. Når hudoverfladen ser ud til at blødde, stoppes kompressionen øjeblikkeligt, og blodet kan infiltreres i huden på grund af ufuldstændig hæmostase. Derfor er komprimeringstiden længere for fuldstændigt at stoppe blødningen. Hvis der er en tendens til at blø, bør komprimeringstiden forlænges. 3, efter at blodet får symptomer på besvimelse, såsom: svimmelhed, svimmelhed, træthed osv. Skal straks lægge sig, drikke en lille mængde sirup og derefter gennemgå en fysisk undersøgelse, efter at symptomerne er lettet. 4. Hvis der er lokal overbelastning, skal du bruge et varmt håndklæde efter 24 timer for at fremme absorption. Inspektionsproces 1. Princip for indirekte immunofluorescens test for malaria Anti-Plasmodium-antistoffet i testserumet kombineres med Plasmodium-antigenet på blodskiven efterfulgt af det fluorescerende mærkede anti-humane IgG-antistof, der virker på det humane IgG på blodskiven og udviser fluorescens på antigenstedet. 2, reagenser (1) Antigenblodfilmen er en tynd blodfilm af Plasmodium cynomolgus og en tynd blodfilm af Plasmodium falciparum. Professionelle forskningsinstitutioner er tilgængelige. Opbevares i 4 ° C eller fryser til lav temperatur. (2) Fluorescerende mærket anti-humant IgG, som er kommercielt tilgængeligt i landet. 3, driftsmetoden (1) Serum blev opsamlet ved en konventionel metode, eller en cirkulær blot blev presset på filterpapiret med et rør af et glas (jern) -rør på 1,2 cm i diameter. Blod tages fra patientens øre eller finger og fyldes med en cirkel. Blodvolumen er ca. 20 μl (ca. 10 μl serum). Efter antallet er tørret anbringes det i en forseglet plastpose med tørremiddel og transporteres til laboratoriet ved 4 ° C. Spar i et halvt år, -20 ° C kan opbevares i 2 år. Under testen blev de tørrede bloddråber skåret i brøndene i reaktionspladen, 0,2 ml (pH 7,2) 0,01 mol / l phosphatbuffer blev tilsat, og serumfortynding svarende til 1:20 blev opnået ved blødgøring natten over ved 4 ° C. (2) Fjern antigenblodfilmen fra køleskabet, og blæs den straks tør med en elektrisk ventilator. Opdel hvert antigenark i flere små celler med en særlig farveblyant. Prøv 1 prøve eller 1 titer pr. Celle, og tilsæt 1 serum pr. Celle. dråber. Negativt positivt referenceserum og PBS-blanke kontroller var påkrævet for hver batch af forsøg. Umiddelbart efter tilsætning af serum blev blandingen overført til en våd kasse, og efter inkubering ved 37 ° C i 30 minutter blev den langsomt vasket med 0,01 mol / L PBS (pH 7,2) og derefter neddyppet i en PBS-cylinder i 5 til 10 minutter. (3) Fortynd det anti-humane IgG-fluorescerende antistof fortyndet 1:10 med 0,01 mol / l PBS (pH 7,2), og anbring det i det fugtige kammer ved 37 ° C i 30 minutter. Efter vask med den samme metode tilsættes glycerol og PBS til hver celle. En ens mængde blandet opløsning eller destilleret vand blev påført på dækplader, og resultaterne af reaktionen blev undersøgt under et fluorescensmikroskop. (4) Fortolkning af resultater: Fluorescensintensitet og strukturklarhed af schizont og trophozoite-cytoplasma skelnes, ingen fluorescens er (-), fluorescens er svag, morfologisk struktur er uklar (±), fluorescens er svag og morfologisk struktur Det er stadig klart (+) og er yderligere opdelt i (2+) til (4+) i henhold til stigningen i fluorescenslysstyrke og strukturel definition. Generelt vurderes fluorescensintensiteten (+) eller mere at være positiv ved en 1:20 serumfortynding. Ikke egnet til mængden De, der ikke har en indikation til undersøgelse, bør ikke foretage denne kontrol. Bivirkninger og risici Generelt ingen komplikationer og skade.